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其他方法試劑盒

磷脂酰肌醇3磷酸(PIP3)ELISA試劑盒-競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè): 上海恒遠(yuǎn)生物從事酶聯(lián)免疫學(xué)10年有余，技術(shù)成熟，產(chǎn)品穩(wěn)定。恒遠(yuǎn)品牌自主研發(fā)ELISA試劑盒，現(xiàn)已涵蓋20多個(gè)種屬，數(shù)千種產(chǎn)品，涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個(gè)研究領(lǐng)域。其ELISA試劑盒不僅檢測(cè)指標(biāo)豐富，還可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求定制檢測(cè)范圍，并且提供實(shí)驗(yàn)外包與免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。歡迎您來(lái)電咨詢。

產(chǎn)品詳情相關(guān)產(chǎn)品

磷脂酰肌醇3磷酸(PIP3)ELISA試劑盒

貨號(hào)：HB158-SH

規(guī)格：96T

價(jià)格：￥2500

本試劑盒僅供研究使用。

使用目的：

本試劑盒用于測(cè)定樣本中磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）的含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定標(biāo)本中磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）水平。用純化的磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P），和HRP標(biāo)記的磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）抗原，使它們競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）的含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）的含量。

試劑盒組成

1	30倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	8	標(biāo)準(zhǔn)品S1（800 ng/L）	0.5ml×1瓶
2	酶標(biāo)試劑	6ml×1瓶		標(biāo)準(zhǔn)品S2（400 ng/L）	0.5ml×1瓶
3	酶標(biāo)包被板	12孔×8條		標(biāo)準(zhǔn)品S3（200 ng/L）	0.5ml×1瓶
4	顯色劑A液	6ml×1瓶		標(biāo)準(zhǔn)品S4（100ng/L ）	0.5ml×1瓶
5	顯色劑B液	6ml×1瓶		標(biāo)準(zhǔn)品S5（50ng/L）	0.5ml×1瓶
6	終止液	6ml×1/瓶	9	說(shuō)明書	1份
7	樣品稀釋液	6ml×1/瓶	10	封板膜	2張

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本處理：（1）水樣采集后經(jīng) -20℃反復(fù)凍融三次，再經(jīng)玻璃纖維過(guò)濾后，備查

（2）組織樣品用丁醇：甲醇：水(5：25：70 V：V：V)抽提，或按相關(guān)文獻(xiàn)提取進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，備查

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)孔中加50微升，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

2. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

7. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

8. 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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